本标准物质主要用于 ATP 荧光检测仪的校准、生物样本中 ATP 的定量检测。
一、样品制备
本标准物质是选取 HPLC-UV 纯度高于 99%的 5’-三磷酸腺苷(ATP)二钠盐纯品,经结构确证、纯度验证和均匀性初检合格后,分装成 10 mg/瓶,旋口茶色玻璃瓶包装。
二、溯源性及定值方法
本标准物质采用 UV/NMR/IR/MS 四谱进行化合物结构确证,采用两种不同原理、经确认的纯度测量程序开展联合定值。其中,质量平衡法是以液相色谱法(DAD 检测器)得到有机纯度值,以卡尔费休库仑法和热重法、电感耦合等离子体质谱法和发射光谱法、离子色谱法、气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法得到水分、无机元素杂质、阴离子杂质、挥发性溶剂和有机物杂质含量,综合给出纯度定值结果;定量核磁法采用经纯度验证的马来酸标准物质作为内标,选择特定的质子共振峰进行定值。两种方法等精度,以二者结果的算术平均值作为标准值。通过采取适当的校准程序和测量标准(含标准物质),使用满足计量学特性要求的测量方法和计量器具,保证标准物质量值的溯源性,使量值(%,g/100g)可靠溯源至物质的量和质量的 SI 基本单位:摩尔(mol)和千克(kg)。
三、特性量值及不确定度
编号
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名称
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标准值(质量分数,%)
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扩展不确定度
(质量分数,%)(k=2)
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GBW(E)091151
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5’-三磷酸腺苷(ATP)二钠盐
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92.0
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0.8
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标准值为 5’-三磷酸腺苷(ATP)二钠盐的质量分数,扣除了所含结晶水和吸附水等杂质。标准 值的不确定度综合考虑了质量平衡法的主体纯度定值结果和水分、无机杂质、阴离子杂质、挥发性 溶剂和有机杂质定量以及定量核磁法测量、均匀性、稳定性等引入的不确定度分量。
四、均匀性及稳定性评估
参照 JJF1343 国家计量技术规范(等效 ISO 指南 35),采用高效液相色谱法(DAD 检测器),按照随机抽样原则对样品进行均匀性评估,评估结果表明,样品均匀性良好;采用相同测量方法对样品进行稳定性评估,评估结果表明,样品稳定性良好。
本标准物质最小取样量为 0.5 mg,只有在遵循最小取样量的前提下,标准物质的特性值及其不确定度才是有效的。本标准物质自定值日期起有效期 2 年,研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性,有效期内如发现量值变化,将及时通知用户。
五、包装、贮存及使用
1. 包装:本标准物质采用棕色旋口玻璃瓶包装,每瓶不少于 10 mg。
2. 贮存及运输:冷冻(-20℃)、避光条件下保存;冰袋运输。
3. 使用:本标准物质吸入、皮肤接触和不慎吞咽有害,使用时应注意防护。样品开封后,应尽快恢复密封状态,避免吸潮,在规定条件下保存。