国家药品标准物质使用说明书

体外细胞毒性试验阳性对照品

Positive control for in vitro cytotoxicity

【类别】医疗器械标准物质

【批号】350022-202301

【性状】淡黄色透明固体粒料

【用途】用于医疗产品中细胞毒性体系控制与验证。

【特性量值】使用本品进行体外细胞毒性试验（MTT 法），细胞存活率范围为 35%-60%。

【使用方法和要求】本品使用常规培养基[10%胎牛血清、2% 4mM 谷氨酰胺、88%MEM 空白培养基（不含酚红）]进行浸提。浸提方法如下：无菌操作，取 1g PVC（含 Sn）放置于 15mL 无菌离心管中，按照 3mL/g浸提比例加入浸提介质完全培养基，水平放置振荡，120rpm，37℃条件下浸提 24h。浸提结束后上下颠倒混匀 10 次，取浸提液用于试验。浸提所用的完全培养基作为空白对照。注意配制好的完全培养基在4℃条件下贮存不超过两周。

体外细胞毒性试验采用 MTT 法进行检测：取状态良好的 L929 细胞，消化离心，配制成 1×105/mL 的细胞悬液，接种于 96 孔培养板。每组设立多个复孔，每孔接种 100µL 细胞悬液，置 37℃、5%二氧化碳的 CO2培养箱培养 24h。弃去原培养基，加入 100µL 浸提液、空白对照液，于 CO2培养箱继续培养。24h 后，于显微镜下观察细胞形态。弃去孔内液体，每孔加入 50µL 1mg/mL 的无菌 MTT 溶液（MTT 用 MEM培养基配置，现用现配，不可用完全培养基配制），继续培养 2h 后弃去孔内液体，加入 100µL 异丙醇，振荡混匀，在 570nm 和 650nm 波长下测定吸光度，计算细胞存活率。细胞存活率计算公式如下：

细胞存活率（%）= （详见证书）

其中：A ── 浸提液平均吸光度

A0 ──空白对照平均吸光度

【包装】无色包装袋

【规格】1g/袋

【贮藏】10-30℃保存

【有效期】国家药品标准物质不设具体有效期，按照规定条件保存的样品，在中检院发布停用通知前有效。

声明：

1.请按本品说明书规定使用，若作他用，用户须自行证明适用性;

2.因用户使用或储存不当所引起的损害或投诉，用户自行承担相关责任;

3.用户收到本品后应立即核对品种、数量、包装等，若出现质量、数量等不符，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失。