大肠埃希氏菌作为理想的粪便污染指示菌，常用做饮用水卫生状况的指示菌，是监测饮用水卫生质量的首选微生物。生活饮用水中大肠埃希氏菌数的准确测定直接影响生活饮用水的安全，与饮用水的质量密切相关。本标准物质可用于生活饮用水中大肠埃希氏菌测量方法评价、能力验证、仪器校准以及大肠埃希氏菌培养基生长率评价。

一、 样品制备

本标准物质候选物采用大肠埃希氏菌（Escherichia coli）标准菌株（CICC，菌株编号 10003），经过划线、活化、扩大培养后，用高速冷冻离心机离心收集大肠埃希氏菌。制备一定浓度的细菌匀液，与冻干保护剂混匀，在无菌洁净环境条件下，利用移液器进行分装至透明西林瓶中，冻干后充氮气压盖密封。

二、 溯源性及定值方法

本标准物质由多家实验室采用滤膜法进行合作定值。定值测量程序参考 GB/T 5750.12—2023《生活饮用水标准检验方法 第 12 部分：微生物指标》，是通过对标准物质样品进行复溶、稀释至一定体积，并通过滤膜法过滤后放置于培养基上进行培养，选择可以计数的稀释度平板上的菌落数进行计数，采用公式计算得到活菌浓度，其量值单位是 CFU/100 mL（CFU，菌落形成单位 Colony-Forming Units）。通过使用经确认的测量程序和经检定/校准的容量计量器具，确保本标准物质的量值溯源至实体数基本单位“一”（符号：1）。

三、 特性量值及不确定度

生活饮用水中大肠埃希氏菌标准物质（MUG 培养基-滤膜法）所赋特性量值的不确定度评定中考虑了测量重复性、移液器、稀释因子等引入的不确定度分量，以及标准物质不均匀性和不稳定性引入的不确定度分量。

四、 均匀性及稳定性评估

参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用 GB/T 5750.12—2023《生活饮用水标准检验方法 第 12 部分：微生物指标》中的滤膜法，按照随机抽样原则对样品进行均匀性评估，方差分析结果表明，样品均匀性良好；采用相同测量方法，按照先密后疏的原则对样品进行稳定性评估，趋势分析结果表明，-80°C 下可以长期稳定保存，-20°C 下可以稳定保存 14 天。

该标准物质自定值之日起，有效期为 20 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、 包装、贮存及使用

1.包装与贮存：本标准物质采用透明西林瓶包装，铝箔袋真空封装。采用干冰方式运输，收到后置于-80℃温度下冷冻保存。

2.使用：本标准物质开瓶后应当一次性完全使用，每个单元标准物质作为独立检测单元。考虑到环境温度和湿度的影响，从-80°C 温度下取出标准物质自然平衡至室温 10 min 后启封，加入 1 mL无菌蒸馏水复溶，定容至 500 mL，根据实验需要稀释到合适浓度尽快使用。

3. 使用后的标准物质包装瓶及实验过程中产生的废液、容器和废物均应在高压蒸汽灭菌后集中处理。