本标准物质主要用于建立下一级 SAA2 标准物质向国际单位制（SI）的可靠溯源，以及同位素稀释质谱法的方法确认，不直接用于免疫方法的校准溯源、正确度评价和质量控制等。

一、 样品制备

本标准物质候选物采用市售高纯重组人血清淀粉样蛋白 A 2（Serum Amyloid A 2，简称 SAA 2）溶液冻干粉为原料，经定性分析和初步纯度分析满足要求后，在无菌洁净环境条件下分装制备。该蛋白根据 Universal Protein 蛋白质数据库中人血清淀粉样蛋白 A 的等位变异体 A 2（编号P0DJI9）设计，经大肠杆菌重组表达获得。其全长 105 个氨基酸，氨基端额外带有一个甲硫氨酸。

氨基酸序列如下：MRSFFSFLGE AFDGARDMWR AYSDMREANY IGSDKYFHAR GNYDAAKRGP GGAWAAEVIS NARENIQRLT GHGAEDSLAD QAANKWGRSG RDPNHFRPAG LPEKY

二、 溯源性及定值方法

1）定值方法：

本标准物质采用基于氨基酸水解同位素稀释质谱法和基于特征肽段同位素稀释质谱法的两种不同原理的测量方法定值，经 F 检验和 t 检验证明两种方法具有方差等精度和平均值一致性，将两种方法定值结果的算术平均值作为标准物质的特性量值。

2）溯源性：

标准物质的量值通过采用国际公认的潜在基准测量方法同位素稀释质谱法定值，采用量值具有溯源性的国家一级有证标准物质作为参考测量标准，并使用经检定/校准的计量器具，确保本标准物质的量值溯源至 SI 基本单位摩尔（mol）和千克（kg）。两种方法采用国家氨基酸一级标准物质 L-亮氨酸纯度标准物质（GBW09237）和 L-异亮氨酸纯度标准物质（GBW09238）作为参考测量标准。

三、 特性量值及不确定度

标准值的不确定度综合考虑了由定值、样品均匀性和稳定性引入的不确定度分量。

四、 均匀性及稳定性评估

参照国家计量技术规范 JJF 1343-2022 和国际标准 ISO 33405: 2024，采用基于氨基酸水解的同位素稀释质谱法，按照随机抽样原则对样品中的 SAA2 的质量浓度进行均匀性评估，评估结果表明，样品均匀性良好；采用基于特征肽段的同位素稀释质谱法和高效液相色谱法，对样品进行稳定性评估，按照先密后疏的原则评估 12 个月的稳定性，特性值无方向性变化，评估结果表明，样品稳定性良好。

本标准物质复溶后最小取样量为 10 µL，只有在遵循最小取样量的前提下，标准物质的特性值及其不确定度才是有效的。本标准物质自定值日期起有效期 12 个月，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、 包装、储存、使用及运输

1. 包装：本标准物质为冻干粉形态，采用 5 mL 西林瓶包装。

2. 储存及运输：本标准物质应在-80℃ 超低温条件下长期保存；运输过程采用干冰保温，确保全程处于冷冻状态。复溶后建议一次性使用完毕。如需多次使用，推荐将复溶液立即分装为单次用量，于-80℃ 冻存，每次使用前取出一支，在冰浴中融化后立即使用，已融化的样品不得再次冻存。若不便分装冻存，复溶液也可于4℃ 密封保存 7 天。

3. 使用：本标准物质为冻干粉形式，建议开启后一次性使用。操作前，先将西林瓶轻轻敲击或低速离心（如 500～1000 r/min，1 分钟），使冻干粉末集中于瓶底。开启瓶盖后，采用称量法进行复溶：将西林瓶置于经校准的天平上，记录总质量 m℃；缓慢加入约 1 g 的 0.01 mol/L 盐酸水溶液（推荐加液量为 0.9500～1.0500 g），记录加液后的总质量 m℃，计算实际加入复溶液质量 Δm = m℃ −m℃。加入后使用移液器反复吹吸，确保冻干粉完全溶解并混匀。注意必须全部复溶，不可分取干粉部分溶解。复溶后应尽快使用，操作全程宜在冰浴上完成，避免反复冻融。使用过程中严格防止沾污。

浓度换算：本标准物质的特性量值（0.096 mg/g）基于准确加入 1.0000 g 复溶液而定值。用户复溶时若实际加入量 Δm 不等于 1.0000 g，应按以下公式计算实际标准值：

实际标准值 = 0.096 mg/g × （1.0000 g / Δm），式中 Δm 为实际加入的复溶液质量，单位 g。例如，若实际加入 1.0100 g 复溶液，则实际标准值为 0.096 × （1.0000/1.0100）= 0.095 mg/g。请根据实际称量结果计算后使用。

当实际加液量Δm在 0.9500 g ~ 1.0500 g 范围内时，按公式换算后的标准值修约至三位小数，其扩展不确定度仍可取 0.004 mg/g（k=2），无需重新计算不确定度。若实际加液量超出该范围，则需按m实际 = 0.004 × （1.0000/Δm）重新修约评定。