【产品名称】

水质（粪）大肠菌群检验纸片-I

【产品用途】

水质（粪）大肠菌群检验纸片-I 可应用于生活饮用水、饮用天然矿泉水的水源水、地表水和废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的检测。

【检验原理】

按MPN法，将一定量的乳糖、指示剂（溴甲酚紫和2，3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及营养成分等吸附于一定面积的无菌滤纸上，在特定的温度（37℃或44.5℃）培养24h，当细菌生长繁殖时，产酸使PH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色。同时，产气过程相应的脱氢酶在适宜的PH范围内，催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。

【使用方法】

1、接 种：根据水样的污染程度确定接种量，原液或选择适宜稀释度稀释液，各吸取五份10 mL分别添加于5袋装有大纸片的塑料袋中（每袋有2张大纸片，对应10mL水样）;吸取五份1 mL分别均匀滴加在5袋小纸片；另外，取1 mL稀释10倍后，再吸取五份稀释液1 mL分别滴加在5袋小纸片上。然后用手将检验纸片轻轻压平，袋口朝上竖直放置于恒温培养箱培养。

2、培养：检测总大肠菌群时，在36℃-38℃条件下培养18~24h后观察结果；检测粪大肠菌群时，在44.5±0.5℃的条件下培养18~24h后观察结果。

3．结果判读：

（1）纸片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。

（2）纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。

（3）纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。

（4）纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。

（5）纸片无变化，为阴性。

4．结果报告：根据不同接种量的阳性纸片数量，查相应的MPN表（见HJ 755-2015附录B），按公式（1）换算并报告1L水样中总大肠菌群或粪大肠菌群数：

C=100×M/Q （1）

式中：C-水样总大肠菌群或粪大肠菌群浓度（MPN/L）

M-查MPN表得到的MPN值（MPN/100mL）

Q-实际水样最大接种量（mL）

100-为10×10mL，其中，10将MPN值的单位MPN/100mL转换为MPN/L，10mL为MPN表中最大接种量。

5.结果表示：测定结果保留二位有效数字，大于等于100时以科学计数法表示，结果的单位为MPN/L。平均值以几何平均计算。

【质量控制】

1. 理化指标：加水后，纸片pH值7.0-7.3。

2.本品接种下列菌株，置于温箱中培养18-24h,结果如下：

指标	质控菌株及编号	培养温度	特征性反应
生长率	大肠埃希氏菌  ATCC25922	36～38℃	纸片变黄，并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。
	金黄色葡萄球菌ATCC6538		纸片保持紫色不变
	大肠埃希氏菌  ATCC25922	44.5±0.5℃	纸片变黄，并在黄色背景上呈现红点或片状红晕。
	产气肠杆菌ATCC13048		纸片保持紫色不变

纸片样式图

以HJ 755-2015 水质 总大肠菌群和粪大肠菌群的测定纸片快速法 检测生活污水和医疗机构排放污水（处理后）为例，其中一个样品接种3个浓度梯度，每个浓度梯度接种5张纸片：